问题

可能原因

解决方法

显色淡，灵敏度偏低

1．试剂盒在运输途中时间太长，温度太高

尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温

2．试剂盒未充分平衡

试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。

3．温度不足最佳反应温度

尽量满足温度要求

4．保温时间不足

校正定时钟准确定时

5．洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加

按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数

6．移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁

校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密，吸嘴内壁要清洁，最好一次性使用

7．蒸馏水水质有问题

使用新鲜合格的蒸馏水

8．底物作用时间不足

准确定时

9．酶标仪滤光片设定不正确，滤光片不匹配

重新按所须设置滤光片

10.浓缩抗体稀释不正确

严格按说明说操作（现用现稀释）

背景深，全部呈有色,临界对照OD值超出规定范围

1．洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留

浓缩洗液准确配制；20倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释；充分洗涤，彻底拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染

2．样品污染

样品应新鲜采集，或低温保存，防止污染

3．培养箱温度超过37℃或反应时间过长

调整培养箱温度，准确定时

4．吸嘴重复使用，未洗净或消毒不彻底

吸嘴尽可能一次性使用

5．蒸馏水被污染

使用新鲜蒸馏水

6．酶等试剂混用

不同批号试剂勿混用

7．一次实验的标本量过多，加样时间太长，导致实际反应时间延长

合理安排实验，避免几块酶标板同时加样

重复性不佳

1．样品数量多少不一，加样时间有长有短

重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近

2．保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致

重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性

3．加样量不一致

样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴

出现白板，阳性对照不显色

1．未加A、B显色液

不要漏加A液和B液

2．洗涤液配制有误

请按说明书所示稀释倍数配制

3．未加酶结合物而认为已加入

注意不要漏加

4．终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用

每次加液前均应看清标签

样本回收率低

1．添加浓度量不准确或添加浓度不合适，取样本提取液吹干的量不准确，

校正移液器，根据曲线来添加最适浓度

反应板出现一片白或一片有色或临界对照OD值超出规定范围多是实验中某一环节发生问题，若逐一排除可能原因重复实验仍出现上述情况，可与另一批号试剂盒进行对照以排除试剂盒质量问题的可能性。